Hvad er western blotting?

Hvad er western blotting?
Anonim

Svar:

Det er brugen af antistoffer at detektere proteiner, der er blevet adskilt af SDS-PAGE og derefter overført til en membran.

Forklaring:

Celler indeholder en blanding af proteiner (mange tusinder), og disse kan adskilles af SDS-PAGE.

Proteinerne fra SDS-PAGE overføres derefter ved anvendelse af et elektrisk felt fra gelen til en membran, der typisk fremstilles nitrocellulose eller polyvinylidenfluorid (PVDF).

Membranen probes med et primært antistof specifikt for proteinet af interesse. Et sekundært antistof anvendes derefter til at detektere det primære antistof. Det sekundære antistof vil indeholde en markør, som kan detekteres ved en kemisk reaktion for enten at give et synligt band på membranen eller et signal, som kan optages af et specialiseret kamera.

Om nødvendigt kan jeg udvide dette svar dybt, da jeg har udført flere hundrede Western blots i løbet af min karriere.