Svar:
Typisk er dette en antistofspecificitetstest.
Forklaring:
I en ELISA er det meget svært at fortælle om dit antistof er bindende for dit protein af interesse, et helt andet protein eller en række proteiner.
Western blot vil blive brugt til at kontrollere antistoffets specificitet (det skal bemærkes, at Western blot måske ikke registrerer alle krydsreaktioner med forkerte proteiner).
I Western blot kan du se størrelsen af det protein, som antistoffet er bindende til (du kan ikke i en ELISA). For eksempel, hvis dit antistof skal være bindende til et protein på 56 kDa og du ser et bånd på ~ 56 kDa på blottet, så kan du være rimeligt sikker på, at antistoffet er bindende til det korrekte protein.
Hvis du på den anden side så et bånd på 32 kDa, kunne du konkludere, at antistoffet er bindende til det forkerte protein. På samme måde ville det, hvis mange bands dukkede op på Western blot, foreslå (i fravær af proteinnedbrydning), at antistoffet var bindende til en række forskellige proteiner.
I eksemplet på 32 kDa båndet, der vises på gelen og også de multiple bånd, vil det foreslå, at antistoffet mangler specificitet for ELISA'et, og at ethvert resultat set i ELISA'et ikke kan være specifikt for proteinet af interesse.
Hvis jeg blev kørt af denne type test, kan jeg inkludere en slags "interfererende" reagens til at teste antistoffet. Hvis jeg for eksempel havde opdraget mit antistof mod et peptid, kan jeg inkludere peptidet i den primære antistofopløsning for at teste for korrekt binding. Det vil sige, i nærvær af peptidet bør jeg ikke se noget band eller intet resultat fra ELISA'et, da mit primære antistof ikke ville være i stand til at binde på grund af tilstedeværelsen af et overskud af peptidet.
Hvad bruges aforisme til? + Eksempel
En aforisme er en kort sætning eller sætning, der udtrykker mening eller erklæring om visdom. Når det er sagt, er en aforisme bare en forkortet måde at sige noget på, som kunne forklares mere detaljeret. For eksempel kan nogen vælge at sige "Hvis det ikke er blækket, skal du ikke rette det" i stedet for at sige: "Jeg tror ikke, vi skal rette det, fordi jeg ikke kan se, hvordan det er nødvendigt."
Hvorfor bruges litotes? + Eksempel
Litotes bruger underdrivelse til at fremhæve en ide eller situation. Litografier pr. Definition er taletyper, der skaber en underdrivelse ved at bruge dobbelt negativer. For eksempel: "Hun er ikke en meget jordnær person." "Sour Blasterz candy var ikke sur, for at være ærlig." "At spille udenfor under tordenvejr er ikke en god idé." Litotes forsætligt bruger underdrivelser for at skabe en ironisk effekt. De er også dobbelt negative udsagn, da de bekræfter en ide ved at negere det modsatte. Endnu vigtigere er det dog opmærksom på en bestemt ide.
Hvorfor GAPDH bruges i Western Blot? + Eksempel
GAPDH bruges ofte som belastningskontrol. I Western blotting bruger vi ofte GAPDH som en belastningskontrol. Hvad dette betyder er, at ved at undersøge for GAPDH, kan vi kontrollere, at vi har en ladet tilsvarende mængder proteiner på forskellige baner i blottet. Et eksempel på brug - siger vi har en sygdom, som vi mener, forårsager en forhøjelse af et bestemt protein i cellen. Vi ville lave en prøve fra "sunde" celler og en anden prøve fra "syge" celler. Vi ville derefter indlæse tilsvarende proteinmængder af begge prøver på en gel for Western