Svar:
Mange…
Forklaring:
Der er mange grunde til, at bands måske ikke vises på en western blot. Har prøve- og antistofkombinationerne arbejdet tidligere?
Nedenfor er kun nogle, jeg kan tænke på i øjeblikket, der kan få båndene ikke til at vises:
-
Overførte proteinet fra gelen? Prøv at farve membranen med noget som ponceau S eller amido sort for at se om båndene er til stede. Nogle gange kan du se proteinbåndene på membranen ved at væde det og holde det i en vinkel på lyset.
-
Er det primære antistof arbejde? Dette er en svært at teste, og den eneste måde du kan, er ved at inkludere en positiv kontrol, hvor du ved, at du har proteinet af interesse, der er til stede. Hvis du har noget af proteinet af interesse, kan du prøve at spotte det på den vestlige blottemembran (dvs. du løber ikke gelen) og se om du får et resultat, hvis du behandler membranen som om det var en western blot.
-
Er det sekundære antistof genkende det primære antistof? Igen, en hård en til at teste. Om den eneste test, du kan gøre, er stedetprøven nævnt ovenfor i 2.
-
Fungerer "detektionssystemet"? Afhængigt af detekteringsmetoden du bruger, kan du forsøge at spike i nogle af det sekundære antistof for at se om detektionsopløsningen og også udløsningsmidlet / enzymet på det sekundære antistof virker. Det vil sige, kan du udløse reaktionen bare med det sekundære antistof?
Endelig kunne det være så enkelt som en af de løsninger, der blev brugt under sonderingen af plottet, der blev oprettet ukorrekt. Hvis for eksempel saltkoncentrationen er forkert i bufferen, kan dette medføre, at antistofferne frigives fra blottet. Det samme ville også ske, hvis bufferens pH var forkert.
Den "mærkelige" årsag til en western blotning, der ikke virker som jeg har oplevet, var, da vi skiftede leverandøren af det mælkepulver, vi plejede at blokere membranen. Pulveret fra den nye leverandør indeholdt en phosphotyrosinphosphatase, som fjernede alle de fosfatgrupper, som vi forsøgte at opdage med vores anti-phosphotyrosin-antistof.
Vejret (vises / vises) for at være behageligt today.which vises korrekt eller vises?
"Vises" ville være det rigtige svar. "Vises" bruger den korrekte form af verben (vises) for emnet "vejr".
Hvad sker der, hvis en A-person får B-blod? Hvad sker der, hvis en AB-type person får B-blod? Hvad sker der, hvis en B-type person får O-blod? Hvad sker der, hvis en B-type person modtager AB-blod?
For at starte med typerne og hvad de kan acceptere: Et blod kan acceptere A eller O blod ikke B eller AB blod. B blod kan acceptere B eller O blod Ikke A eller AB blod. AB blod er en universel blodtype, hvilket betyder at det kan acceptere enhver form for blod, det er en universel modtager. Der er O-type blod, der kan bruges med en hvilken som helst blodtype, men det er lidt sværere end AB-typen, da det kan gives bedre end modtaget. Hvis blodtyper, der ikke kan blandes, blandes af en eller anden grund, blandes blodcellerne af hver type sammen inde i blodkarrene, hvilket forhindrer korrekt blodcirkulation i kroppen. De
Hvad kan der ske i et fællesskab, hvis landmændene ikke plantede bælgplanteafgrøder?
Afgrøder ville miste potentialet i fremtiden. Bælgplanter hjælper med at genoprette nogle af næringsstoffer i jorden, især fosfor. Uden disse næringsstoffer ville jorden ødelægge og efter så lang tid ville være at blive mere og mere sand som. For ikke at nævne, at folk spiser disse afgrøder.