Hvorfor opbevares restriktionsenzymer i 50% glycerolopløsning?

Hvorfor opbevares restriktionsenzymer i 50% glycerolopløsning?
Anonim

Svar:

For at holde dem intakte …

Forklaring:

Restriktionsenzymer anvendes i meget små mængder, men købes normalt i lidt større partier.

Hvis du for intet andet, foretrækker du normalt at lave forskellige tests med samme batch. Det købte parti skal derfor opbevares i længere tid.

De fleste enzymer er helt tilfredse i deres buffer ved 4degrees Celsius i et stykke tid, men vil efterhånden nedbrydes. 24 timer er normalt den accepterede grænse.

Ved længerevarende opbevaring skal partiet fryses. -20C er standarden, og vil holde den i flere måneder. I endnu længere perioder (fx et eller flere år) er -70 ° C normen.

Det er nødvendigt at fryse det hurtigt og i små beholdere (for eksempel Eppendorfs) for at undgå optøning / refreezing for ofte.

For at undgå beskadigelse af proteinet ved sådanne lave temperaturer kan stabilisatorer tilsættes, såsom DTT (Di-Thio-Treitol), Serumalbumin og vigtigst af alt Glycerol (5-50%)

Mærkeligt nok ved -20 ° C er det nødvendigt at bruge 50% glycerol, mens der ved -70 glycerol ikke er virkelig nødvendigt, selvom tilsætning af det kan hjælpe med at stabilisere proteinet.