Hvordan isolerer forskere DNA for at studere det?

Hvordan isolerer forskere DNA for at studere det?
Anonim

Svar:

Der er et par skridt til at gøre dette, vær venlig at ignorere min dårlige engelsk, jeg håber du kan stadig forstå processen.

Forklaring:

Det er ikke så svært, som du måske tror.

Lad os sige, at vi vil isolere DNA ud af en kalv thymus, du skal følge disse instruktioner (de er de samme for et æble så vidt jeg ved, men der er små variationer):

  1. Tag 3 stykker af 3 gram og skær det i små stykker, så lille som muligt.

  2. Sæt det i en blender med 75 ml saltvand-natriumcitrat (SSC) pr. Stykke og sørg for, at blenderens blader er helt dækket af SSC, så tilsæt et stykke thymus, hvis du har brug for det.

    SSC sørger for, at cellemembranerne bliver opløst.

    Bliv ved med at blande, indtil alt er glat.

  3. Sæt det i et rør til centrifugen og tør det med et andet rør, så centrifugen ikke går i stykker

  4. Anbring røret i centrifugen i 20 minutter ved 5000 rpm

  5. Når du får rørene ud af centrifugen, skal du se, at der er to komponenter. Bunden har et fast stof, dette kaldes pellet og dette holder cellekernerne med DNA'et. Du vil også se et flydende stof, som kaldes supernatanten, og dette består af SSC med de opløste cellemembraner.

  6. Hæld supernatanten i en væskebevægelse, dette kaldes dekantering, og det efterlader dig med pellet.

  7. Sæt en lille mængde 2,2 M NaCl i røret med pellet, så pelleten bare er dækket af NaCl. NaCl forårsager proteinerne, der omgiver DNA'et til udfældning.

  8. Rør det med et tomt reagensglas eller omrøringsstang. Til sidst skal du få to komponenter. Proteinerne på bunden og en viskøs væske oven på det.

  9. Tag det viskøse væske ud med en pipette og sørg for, at du ikke tager proteiner med det viskøse væske. (meget små stykker protein er meget vanskelige at undgå, men forsøg at undgå så mange proteiner som muligt)

  10. Sæt det viskøse væske, som du pipetterede i et bægerglas og tilsæt 2 gange så meget ethanol til det. Men tilføj ethanolet forsigtigt, fordi du ikke vil blande det med DNA'et. Ved grænsefladen mellem ethanol og det viskøse væske bør du se, at DNA-bobler kommer op.

  11. Rør forsigtigt med en glasstang, DNA'et er negativt ladet, så det skal holde fast i stangen.

  12. Sæt det i et reagensglas og opløs det med SSC.

En speciel maskine kan så fortælle dig, hvor meget DNA du har isoleret og hvor rent det er.